黄豆中卵白质含量的测定
一、黄豆含量目的中卵以及要求
①经由本试验加深对于凯氏定氮法测定道理的意见以及清晰。
②经由本试验把握凯氏定氮法中样品消化、白质蒸馏、测定罗致等本领的黄豆含量操作。
二、中卵道理
本试验是白质运用卵白质是含氮的有机化合物,当食物与硫酸以及催化剂一起加热消化时,测定使卵白质分解,黄豆含量分解的中卵氮与硫酸散漫天生硫酸铵。而后再碱化蒸馏使氨游离,白质用硼酸罗致后再以盐酸尺度溶液滴定,测定最后凭证酸的黄豆含量破费量乘以换算系数,即为卵白质含量。中卵
三、白质仪器
①500mL凯氏烧瓶。
②定氮蒸馏装置。
四、试剂
①硫酸铜。
②硫酸钾。
③硫酸。
④40g/L硼酸溶液。
⑤混合调拨剂。
⑥400g/L氢氧化钠溶液。
⑦0.1000mol/L盐酸尺度溶液。
五、试验步骤
一、样品的消化
将黄豆破碎捣毁,过40目筛,混匀后精确称取黄豆粉0.30g,留意移入lOOmL干燥的凯氏烧瓶中(勿黏附在瓶壁上),退出0.2g硫酸铜、3g硫酸钾及5mL硫酸(每一克样品加硫酸15mL),稍摇匀后,将瓶以45°斜支有石棉网的电炉上,先以小火飞快加热(沸腾的泡沫不逾越瓶肚的2/3),待内容物全副炭化,泡沫残缺停止后,增强火力,并坚持瓶内液体微沸,直至液体呈蓝色廓清透明后,再不断加热0.5h,实现消化。
待消化液冷至室温后,用蒸馏水清洁地转入lOOmL容量瓶中,并用蒸馏水定容,摇匀,(消化液在临用前再稀释定容)。
二、蒸馏与罗致
衔接好微量定氮蒸馏装置,于水蒸气爆发瓶内装水至2/3容积处,加甲基橙调拨剂数滴及硫酸数毫升,以坚持水呈酸性,退出数粒玻璃珠,加热煮滚水蒸气爆发瓶内的水。魔难装置的气密性。
在接管瓶内退出25mL 40g/L硼酸及2滴混合调拨剂,将冷凝管下端插入液面如下。精确量作废化稀释液lOmL经漏斗口退出反映管内,用大批蒸馏水冲洗漏斗。经漏斗再退出lOmL 40g/L氢氧化钠溶液使其呈强碱性,赶快夹好漏斗夹,并加大批水于进样漏斗中封口,以防漏气。夹紧废液倾轧口的螺旋夹,妨碍水蒸气蒸馏。蒸馏至冷凝管下真个罗致液酿成绿色开始计时,不断蒸馏3min后,将冷凝管尖端提离液面再蒸馏1min,用蒸馏水冲洗冷凝管尖端后停止蒸馏。
三、滴定
罗致液用0.1000mol/L盐酸尺度溶液滴定至溶液泛起微红色在30s内不用逝即为抵达滴定尽头。
四、空缺试验
不加试样,按上述操作妨碍空缺试验。
六、服从处置
式中:X——卵白质的品质分数,%;
c——HCl尺度溶液的浓度,mol/L;
V1——滴定样品罗致液时破费盐酸尺度溶液体积,mL;
V2——滴定空缺罗致液时破费盐酸尺度溶液体积,mL;
V3——排汇消化液的体积,单元为毫升,mL ;
m——黄豆粉的品质,g;
氮的摩尔品质,14.01g/mol;
F——黄豆的卵白质含量换算系数(5.71)。
七、剖析及留意事变
①消化历程应留意转折凯氏烧瓶,运用冷凝酸液将附着在瓶壁上的炭粒冲下,以增长消化残缺。
②样品含脂肪或者糖较多时,易发生泡沫,可退出大批辛醇或者液体石蜡,或者硅油消泡剂,防止其溢出瓶外,并留意适量操作热源强度。
③硫酸铜起到催化熏染,减速氧化分解。同时也是蒸馏时样品液碱化的调拨剂,若所加碱量缺少,分解液泛起蓝色不天生氢氧化铜积淀,需再削减氢氧化钠用量。
④蒸馏历程应留意接口处有无松漏天气,蒸馏竣事,先将蒸馏进口并吞液面,不断蒸馏1min,将附着在尖真个罗致液残缺洗入罗致瓶内,再将罗致瓶移开,最后封锁电源,绝不能先封锁电源,否则罗致液将爆发倒吸天气。
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相关链接:食物,卵白质,甲基橙,盐酸
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